自體血小板濃縮物(APC)PRP、PRF、CGF的制備方法
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- 發(fā)布時間:2024-12-09 11:40
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【概要描述】自體血小板濃縮物(APC)PRP、PRF、CGF的制備方法。富血小板血漿(PRP)、富血小板纖維蛋白(PRF)和濃縮生長因子(CGF)。這些APC具有不同的結(jié)構(gòu)特征,具體取決于不同的制備方法,并包含血小板、白細(xì)胞和多種生長因子。
自體血小板濃縮物(APC)PRP、PRF、CGF的制備方法
【概要描述】自體血小板濃縮物(APC)PRP、PRF、CGF的制備方法。富血小板血漿(PRP)、富血小板纖維蛋白(PRF)和濃縮生長因子(CGF)。這些APC具有不同的結(jié)構(gòu)特征,具體取決于不同的制備方法,并包含血小板、白細(xì)胞和多種生長因子。
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使用患者自身外周血的自體生長因子在生物學(xué)上實現(xiàn)了組織再生的進一步改善。血液制品用于非輸血應(yīng)用受嚴(yán)格的法規(guī)約束。在歐洲共同體內(nèi)部,歐洲議會和理事會 2003年1月27日的第 2002/98/EC 號指令中規(guī)定的現(xiàn)行法規(guī)的主要目標(biāo)是確保高水平的人類健康保護。在歐洲層面,有一個基本原則,即血液成分只有在獲得負(fù)責(zé)輸血活動的國家當(dāng)局授權(quán)后才能使用。
1.第一層包含貧血小板血漿 (PPP),占總體積的 40%;
2.中間層稱為血沉棕黃層 (BC),包含血小板和白細(xì)胞,僅占總體積的 5%;
3.底層由紅細(xì)胞 (RBC) 組成,占總體積的 55%。
02 富血小板纖維蛋白(PRF)
制備:在不使用抗凝劑的情況下收集 10 mL 的靜脈血,然后以 3000 rpm 離心 10 分鐘。在這個過程結(jié)束時,獲得三個不同的層:由 RBC 組成的底層,包含纖維蛋白凝塊的中間層,稱為 PRF,以及由血漿組成的頂層,PPP。
L-PRF 的白細(xì)胞含量低,但血小板攝取能力高,可保持血小板完整性。與 PRGF 一樣,P-PRF 中的纖維蛋白聚合是由氯化鈣誘導(dǎo)的,但與所有類別的 PRP 相比,所得的纖維蛋白基質(zhì)更致密、更穩(wěn)定。另一方面,L-PRF 是第一種不使用抗凝劑或膠凝劑的血小板濃縮物。這確保了血小板和白細(xì)胞的完整性,它們?nèi)匀淮罅勘焕г诿芗睦w維蛋白網(wǎng)網(wǎng)絡(luò)中,這是 L-PRF 的特征 。最后,通過降低 PRF 的離心速度(700 rpm,3 min)開發(fā)了 I-PRF,從而產(chǎn)生可以注射到軟組織、粘膜或皮膚中的液態(tài) PRF。事實上,通過降低離心的速度和持續(xù)時間,可以延遲纖維蛋白凝固的過程。因此,由纖維蛋白原和凝血酶組成的產(chǎn)物在離心后以液態(tài)保持約 20 分鐘,然后最終形成纖維蛋白。這一特性使其成為面部年輕化應(yīng)用的合適物質(zhì)。
03 濃縮生長因子(CGF)
Sacco 于 2006 年開發(fā)的 PRF 的改良形式。通過使用特異性離心機,以交替速度離心血液樣品 (8 mL) 13 分鐘(2700 rpm 下 2 分鐘,2400 rpm 下 4 分鐘,2700 rpm 下 4 分鐘,3000 rpm 下 3 分鐘)獲得 CGF,Medifuge MF200(Silfradent srl,意大利)。在該程序結(jié)束時,可以在樣品中觀察到三個不同的層 :
血漿的上層 PPP、包含纖維蛋白和生長因子 CGF 的中間層以及 RBC 的下層。中間層稱為 CGF,可進一步細(xì)分為上部白色部分、下部紅色部分和中間 BC 。
CGF制備。通過將血液樣品以交替速度離心總共13分鐘來獲得 CGF:2700 rpm 時 2 min,2400 rpm 下 4 min,2700 rpm 下 4 分鐘,3000 rpm 下 3 min。此過程后,樣品分離成三個不同的層:上層由血漿、PPP 組成,中間層由 CGF 組成,底層由 RBC 組成。CGF 可以進一步細(xì)分為三個部分:上部白色部分、下部紅色部分和中間 BC。
PRF 和 PRP 相比,交替速離心過程可形成更致密的纖維蛋白基質(zhì),其中包含更多的生長因子和細(xì)胞。纖維蛋白支架是一個包含血小板、白細(xì)胞和 CD34+ 細(xì)胞的致密網(wǎng)絡(luò)。CGF 中含量更高的生長因子包括 PDGF、TGF-β 1、FGF-b、VEGF、IGF-1、EGF 和 BMP。它們被困在纖維蛋白基質(zhì)中并逐漸釋放,確保再生特性得到控制和持續(xù),并降低與過量生長因子相關(guān)的炎癥反應(yīng)的風(fēng)險。
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